Генетические программы: пошаговые действия

Шаг 1: Что такое преимплантационная генетическая диагностика?

Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) - генетический анализ эмбриона на самой ранней стадии развития до его имплантации в матку.

Стоит разделять:

• ПГД для анализа числа хромосом в эмбрионе или преимплантационный генетический скрининг (скрининг анеуплоидий, т.е. лишних или отсутствующих хромосом). Чаще проводится анализ 5 или 7 хромосом, но в последнее время стали доступны технологии анализа всех 23 хромосом с применением технологии микрочипов;
• Преимплантационная генетическая диагностика для анализа специфических транслокаций;
• Преимплантационная генетическая диагностика для анализа носительства моногенных заболеваний, резус-фактора и других характеристик.

Преимплантационная генетическая диагностика может проводится только в программе ЭКО-ИКСИ. Такая программа включает в себя стимуляцию суперовуляции, пункцию фолликулов и получение яйцеклеток, оплодотворение методом ИКСИ, культивирование эмбрионов, биопсию эмбрионов, генетическую диагностику и завершается переносом генетически здорового эмбриона или криоконсервацией.

Надо понимать, что преимплантационная генетическая диагностика - это воздействие на эмбрион и должна проводиться строго по показаниям.

Шаг 2: Показания к проведению ПГД.

– Носительство моногенных генетических заболеваний
– Хромосомные нарушения (хромосомные перестройки, в том числе транслокации, анеуплоидии)
– Старший репродуктивный возраст у женщин
– Повторное невынашивание беременности
– Повторные неудачные попытки ЭКО
– Тяжелый мужской фактор бесплодия
– Необходимость определения Резус-фактора или HLA-типирования эмбриона

Шаг 3: Принятие решения о проведении диагностики.

Для проведения преимплантационного генетического скрининга не требуется специальной подготовки и при наличии показаний и технической возможности решение о проведении скрининга может быть принято даже в процессе культивирования эмбрионов, но желательно принять такое решение еще до или в начале программы ВРТ.

Преимплантационная генетическая диагностика в большинстве остальных ситуаций – более сложная процедура. Этап подготовки может занять до нескольких месяцев и потребовать взятия биоматериала (кровь) родителей для отработки методики анализа, так как молекулярно-генетическая система для анализа разрабатывается специально для каждого конкретного случая.

Шаг 4: В протоколе ВРТ: Когда начинается преимплантационая генетическая диагностика?

Взятие материала эмбриона для анализа (биопсия) может проводится не разных сроках развития эмбриона:

• Биопсия полярных телец ооцита. Полярные тельца - вспомогательные клетки, образующиеся при прохождении яйцеклеткой мейоза (деления, цель которого гаплоидная - с одним набором хромосом - яйцеклетка). Метод биопсии полярных телец технически сложен и имеет существенные ограничения, так как дает косвенную информацию только о яйцеклетке, а не об эмбрионе. Применяется в основном в странах, где действуют ограничения на манипуляции с эмбрионами.
• Биопсия бластомера - наиболее часто используемый метод биопсии. Выполняется на 3-ий день развития эмбриона, когда эмбрион состоит из 6-10 клеток. Ограничением такого метода считается высокий уровень мозаицизма эмбрионов (до 55-73% по оценкам разных авторов), то есть хотя бы одна клетка эмбриона может иметь отличное от других количество хромосом.
• Биопсия трофэктодермы бластоцисты – проводится на 5-6 день развития. Для анализа забирают несколько клеток наружной части бластоцисты, которая не вовлечена в последующее формирование эмбриона и дает начало плаценте. Такой метод биопсии технически сложен, но имеет преимущества: большее количество материала для анализа и гораздо более низкий уровень мозаицизма эмбрионов на этой стадии развития.

В протоколе с ПГД не для всех эмбрионов возможно провести биопсию в необходимые сроки, так как каждый эмбрион имеет свой темп и особенности развития. Материал, который можно взять у эмбриона, не причинив ему вреда, крайне мал и его может оказаться недостаточно для успешного анализа. Таким образом по окончании протокола ВРТ с ПГД могут остаться эмбрионы хорошего качества, для которых генетическая диагностика не была проведена либо не дала результата.

Шаг 5: В протоколе ВРТ: Когда получают результат?

Молекулярно-генетический этап преимплатационной генетической диагностики занимает от 2 и более суток.

В протоколе ВРТ культивирование эмбриона в лабораторных условиях может продолжаться до 5 суток и далее эмбрион должен быть либо перенесен в матку либо криоконсервирован.

Соответственно особенности прохождения протокола с ПГД полностью зависят от времени проведения биопсии эмбриона.

Если биопсия бластомера проводится на 3-ий день, обычно есть возможность сделать перенос эмбрионов в том же лечебном цикле на 5 -ый день развития.

Если принято решение о проведении биопсии трофэктодермы (5-6 день) приходится прибегать к криоконсервации эмбрионов. Перенос эмбрионов проводится в последующем цикле, после получения результатов анализа.

Шаг 6: Результат генетической диагностики: Ограничения метода.

Любой вариант преимплантационной генетической диагностики дает ответ только о наличии или отсутствии какого-то конкретного генетического маркера. Невозможно исключить все генетические заболевания и нарушения.

Существует небольшой риск ошибки при ПГД, который оценивается в 3-10% по данным Европейского общества репродукции и эмбриологии человека. Этот риск обусловлен мозаицизмом эмбрионов и ограничениями используемых методов. Таким образом преимплантационная генетическая диагностика – метод не исключения, а минимизации риска генетических нарушений. После преимплантационной генетической диагностики всегда рекомендуется проведение пренатальной генетической диагностики.